目的探討 miR-499a-5p 高表達靶向基質金屬蛋白酶-16（MMP-16）對急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）大鼠肺損傷的影響。方法實驗設置假手術組、模型組、miR-499a-5p 模擬物組、MMP-16 組、miR-499a-5p 模擬物+MMP-16 組、Nrf2 信號通路抑制劑 D-呋喃核糖基苯并咪唑（DRB）組、miR-499a-5p 模擬物+DRB 組。利用盲腸穿刺的方法構建急性呼吸窘迫綜合征大鼠模型，術前 1 h，用微型注射器將 50 μL 的轉染復合物注入氣管，術前 30 min，腹腔注射 DRB（5 mg/kg）。RT-qPCR 檢測肺組織中 miR-499 和 MMP-16 表達水平；雙熒光素酶報告基因驗證靶向關系；分離模型組大鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞，MMP-16 3’UTR WT 和 MUT 熒光素酶報告質粒分別與 miR-499 共轉染肺泡Ⅱ型上皮細胞，驗證 miR-499 和 MMP-16 靶向關系；蘇木素–伊紅染色觀察肺損傷；酶聯免疫吸附試驗檢測支氣管肺泡灌洗液中炎癥因子和肺組織中氧化應激水平；蛋白印跡法分析肺組織中還原型輔酶/醌氧化還原酶（NQO1）、血紅素加氧酶（HO）-1、核因子 E2 相關因子 2（Nrf2）蛋白表達水平。結果miR-499 在 ARDS 模型大鼠的肺中低表達（P<0.01），而 MMP-16 高表達（P<0.01）；miR-499a-5p 與 MMP-16 3’UTR 區存在結合位點，且 miR-499a-5p 直接靶向負調控 MMP-16 表達（P<0.01）；miR-499a-5p 過表達能夠明顯降低 ARDS 大鼠的肺濕干重比（P<0.05），減輕肺組織損傷（P<0.01），降低支氣管肺泡灌洗液中腫瘤壞死因子-α、白細胞介素（IL）-1β 和 IL-6 含量（P<0.01），降低肺組織中丙二醛和髓過氧化物酶水平，提高總抗氧化能力（P<0.01），上調肺組織中 NQO1、HO-1、Nrf2 蛋白表達（P<0.01）。而加入 MMP-16 和 DRB 后都能夠明顯逆轉該現象。結論miR-499a-5p 過表達靶向負調控 MMP-16，通過激活 Nrf2 信號通路來減輕急性呼吸窘迫綜合征大鼠的肺損傷。