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    找到 關鍵詞 包含"微小RNA-451" 1條結果
    • 微小RNA-451靶向調節鈣結合蛋白39對MSCs成骨分化的促進效應

      目的探討微小RNA-451(micro RNA-451,miRNA-451)靶向調節鈣結合蛋白39(calcium binding protein 39,CAB39)表達,促進MSCs向成骨細胞分化的效應。 方法選擇pMIR-report質粒及pRL-TK質粒,通過雙熒光素酶基因報告系統,鑒定CAB39是否為miRNA-451的靶基因。將pre-miRNA-451(A組)及anti-miRNA-451(C組)分別轉染到C3H10T1/2細胞中,同時設置相應的pre-miRNA陰性對照組(B組)和anti-miRNA陰性對照組(D組);成骨誘導培養7、14 d,采用實時熒光定量PCR檢測成骨標志物Runx2、ALP mRNA相對表達量;誘導培養14 d,采用Western blot檢測細胞中CAB39蛋白表達,茜素紅染色觀察細胞外鈣基質沉積情況。 結果經鑒定,CAB39是miRNA-451的靶基因。實時熒光定量PCR檢測示,成骨誘導培養7、14 d,A組Runx2、ALP mRNA相對表達量顯著高于B組,C組顯著低于D組,差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。成骨誘導培養14 d,Western blot檢測示A組CAB39蛋白表達量為0.55 ± 0.05,較B組1.00 ± 0.07明顯降低;而C組為1.21 ± 0.05,較D組1.00 ± 0.04明顯增高;差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。茜素紅染色示A組細胞外鈣基質沉積較B組明顯增多,而C組細胞外鈣基質沉積較D組明顯減少。 結論miRNA-451可通過抑制CAB39表達,促進MSCs成骨分化。

      發表時間:2016-08-31 04:12 導出 下載 收藏 掃碼
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