目的觀察反義DNA甲基轉移酶3b（DNMT3b）基因真核表達載體轉染對人膽管癌QBC-939細胞中DNMT3b基因表達的影響。方法構建反義DNMT3b基因真核表達載體，通過脂質體轉染到人膽管癌細胞株QBC-939中，G418篩選得到穩定轉染細胞株，PCR鑒定外源性neoR基因在轉染細胞中的表達以確定轉染是否成功。半定量RT-PCR觀察轉染前后DNMT3b基因mRNA水平的變化，流式細胞術檢測轉染前后DNMT3b蛋白的變化。 結果反義DNMT3b基因真核表達載體轉染能使人膽管癌QBC-939細胞中DNMT3b基因的mRNA水平從0.956±0.053降低至0.209±0.023，差異有統計學意義（P＜0.01）； 流式細胞術檢測結果顯示，DNMT3b蛋白水平從(75.38±3.22)%降低到(29.87±3.46)%，差異有統計學意義(P＜0.01)。結論反義DNMT3b基因轉染能降低人膽管癌QBC-939細胞中DNMT3b基因的表達水平，為研究DNMT3b基因功能及其在膽管癌細胞中的作用提供了方法和實驗依據。