目的 觀察靶向大鼠沉默信息調節因子1（Sirt1）基因的小干擾（si）RNA慢病毒載體對大鼠視網膜神經節細胞（RGC）中Sirt1表達的影響。 方法 設計4條靶向大鼠Sirt1基因的siRNA靶點序列，構建靶向大鼠Sirt1基因的siRNA慢病毒載體。采用菌落聚合酶鏈反應（PCR）和DNA測序鑒定陽性克隆。應用陽性重組質粒與包裝質粒共轉染293T細胞，進行慢病毒包裝及病毒滴度測定。將RGC分為空白對照組、轉染陰性對照病毒載體組（NC組）以及分別轉染4個帶有干擾序列的si-Sirt1-1組、si-Sirt1-2組、si-Sirt1-3組、si-Sirt1-4組。采用熒光定量PCR及蛋白免疫印跡法（Western blot）分別檢測各組RGC中Sirt1 mRNA、蛋白相對表達量。 結果 菌落PCR鑒定和DNA測序結果顯示，靶向大鼠Sirt1基因的siRNA慢病毒載體構建成功。在293T細胞中成功包裝后，其病毒滴度為8×108 TU/ml。熒光定量PCR和Western blot檢測結果顯示，與NC組比較，si-Sirt1-1組、si-Sirt1-2組、si-Sirt1-3組、si-Sirt1-4組RGC中Sirt1 mRNA、蛋白相對表達量均明顯下降，差異有統計學意義（F=27.682、1 185.206，P=0.000、0.000）；其中，以si-Sirt1-2組Sirt1 mRNA、蛋白相對表達量下降幅度最為明顯。 結論 靶向大鼠Sirt1基因的siRNA慢病毒載體可降低大鼠RGC中sirt1 mRNA、蛋白表達。