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    找到 作者 包含"向旻" 1條結果
    • BMSCs條件培養基改善地塞米松對成骨細胞成骨功能抑制效應的研究

      目的 探討BMSCs的旁分泌作用對地塞米松所致成骨細胞成骨功能抑制作用的影響。 方法 首先通過培養小鼠BMSCs 24 h制備無血清條件培養基備用。將小鼠MC3T3-E1細胞株復蘇并傳至第3代用于實驗,分為4組:A組為對照組;B組于細胞中添加1 μmol/L地塞米松;C組于細胞中按1:1比例添加1 μmol/L地塞米松和BMSCs條件培養基;D組僅添加BMSCs條件培養基。培養24 h后收集細胞測定ALP含量,Western blot測定細胞內RUNX2、骨鈣素(Osteocalcin)蛋白表達,實時熒光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)測定細胞內α1-Ⅰ型膠原(collagen typeⅠ-α 1,COL1A1)、RUNX2、ALP、Osteocalcin基因表達;21 d后行茜素紅染色觀察鈣結節形成情況。 結果 培養24 h后,B、C、D組ALP含量均顯著低于A組,B組低于C、D組(P < 0.05),C、D組間差異無統計學意義(P > 0.05)。Western blot檢測示,B組RUNX2蛋白相對表達量顯著低于A、C、D組(P < 0.05),A、C、D組間比較差異無統計學意義(P > 0.05);B組Osteocalcin蛋白相對表達量均顯著低于A、C、D組,A、C組低于D組(P < 0.05), A、C組間差異無統計學意義(P > 0.05)。RT-qPCR檢測示,B、C、D組RUNX2、Osteocalcin、COL1A1、ALP基因相對表達量均顯著低于A組(P < 0.05);D組RUNX2、Osteocalcin、ALP基因相對表達量均顯著高于B、C組,C組顯著高于B組(P < 0.05);D組COL1A1基因相對表達量顯著高于B組(P < 0.05),B、C組間及C、D組間比較差異均無統計學意義(P > 0.05)。培養6 d時A組細胞死亡;21 d時B、C、D組均可見鈣結節陽性染色,且逐漸增強。 結論 小鼠BMSCs條件培養基能改善地塞米松對成骨細胞成骨功能的抑制效應。

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