目的分析成都中醫藥大學附屬醫院 2016 年—2018 年耐碳青霉烯類腸桿菌科細菌（carbapenem-resistant Enterobacteriaceae，CRE）的耐藥表型、耐藥基因型特點，為臨床合理用藥、有效抗感染治療提供指導。方法選取成都中醫藥大學附屬醫院 2016 年 1 月—2018 年 12 月分離出的 2 901 株腸桿菌科細菌，采用微量肉湯稀釋法和紙片擴散法篩選出 CRE 菌株，選擇保種成功且臨床資料詳實的 CRE 進行碳青霉烯酶表型確證試驗、耐藥基因擴增和測序比對。結果2016 年—2018 年收集的 101 株 CRE 以肺炎克雷伯菌（73.27%，74/101）和大腸埃希菌（14.85%，15/101）為主，標本主要來源于痰液（63.37%，64/101）和導管尿（11.88%，12/101）。碳青霉烯酶表型檢測結果為：改良 Hodge 試驗陽性 94 株，陽性率 93.07%；Carba NP 試驗陽性 96 株，陽性率 95.05%；改良碳青霉烯酶滅活試驗陽性 98 株，陽性率 97.03%。101 株 CRE 中有 92 株（91.01%）檢出耐藥基因，測序結果顯示，66 株（65.35%）攜帶blaKPC-2 型基因，4 株（3.96%）攜帶blaKPC-19 型基因，9 株（8.91%）攜帶blaNDM-1 型基因，13 株（12.87%）攜帶blaNDM-5 型基因。未檢出同時攜帶 2 種耐藥基因的 CRE 菌株。耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌主要攜帶blaKPC-2 基因（82.43%，61/74），耐碳青霉烯類大腸埃希菌主要攜帶blaNDM-5 基因（86.67%，13/15），同國內主要流行基因型相符。結論該院近 3 年 CRE 菌株以攜帶blaKPC-2 基因的肺炎克雷伯菌和攜帶blaNDM-5 基因的大腸埃希菌為主。臨床可根據此試驗結果為指導，結合微生物室藥物敏感性報告合理選擇抗菌藥物，以延緩耐藥菌株的增長，預防多重耐藥菌的醫院傳播。