鉛黃腸球菌(Enterococcus casseliflavus)在誘導劑甘油存在的條件下,經發酵培養可合成和分泌α-磷酸甘油氧化酶。該菌的無細胞抽提液可通過聚乙二醇(PEG)/(NH4)2SO4雙水相萃取法有效進行α-磷酸甘油氧化酶的分離和純化。研究結果表明,PEG分子大小、PEG濃度、pH、(NH4)2SO4濃度和無機鹽及粗酶液的加入量是影響該萃取系統的主要因素,最終確定的最適雙水相系統為16.5% (m/m)PEG2000、13.2%(m/m) (NH4)2SO4、pH 7.5和30%(m/m)的粗酶加入量。無機鹽NaCl的加入對萃取α-磷酸甘油氧化酶會產生負面影響,導致低的純化倍數和活性回收率。此雙水相萃取體系用于放大提取α-磷酸甘油氧化酶,其酶活性回收率可達89%、分配率為1.2、純化倍數為7.0。